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    活性檢測CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒使用說明書

    發布時間:2017/11/16      點擊次數:1777

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    活性檢測CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒

    產品名稱

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    價格(元)

    活性檢測CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒

    D3100L4053

    100T(1ml)

    4

    245

     

    Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 細胞增殖與活性檢測試劑盒是一種基于WST-8的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。其主要成分為水溶性四唑鹽WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的水溶性的甲臜(formazan,參考圖1)。WST-8 被細胞內脫氫酶生物還原后生成的甲臜能夠直接溶解在培養基中。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。

     

    圖1:WST-8分子結構及檢測原理

    運輸與保存方法

    冰袋運輸。CCK-8在4℃可保存一年,在-20℃可以存放數年,反復凍融會造成測定背景O.D值升高,如經常使用,建議存放于4℃即可。

    操作方法

    1. 在96孔板中配制100 μl的細胞懸液。將培養板在培養箱預培養24小時 (在37℃,5% CO2的條件下)。

    2. 向培養板加入10 μl不同濃度的待測物質。如果測定細胞活性,則不需要2-3步驟,直接從第四步操作。

    3. 將培養板在培養箱孵育一段適當的時間 (例如: 6,  12, 24或48小時)。

    4. 向每孔加入10 μl CCK-8溶液 (注意不要在孔中生成氣泡,它們會影響O.D值的讀數)。

    5. 將培養板在培養箱內孵育1-4小時。

    6. 用酶標儀測定在450 nm處的吸光度。

    注意事項

    1)CCK-8試劑盒的檢測依賴于脫氫酶催化反應,如果待檢測體系中有較多還原劑(或抗氧化劑)會造成背景O.D值升高,干擾檢測結果。如果實驗中有還原劑,請檢查背景的O.D值,即測定、比較空白培養基加入藥物與不加藥物的培養基(含細胞)在加入CCK- 8試劑后的O.D值,如果空白O.D值明顯偏高,則說明有反應,應設法去除或折算干擾因素。

    2)如果細胞培養時間較長,培養基顏色發生變化,應洗滌細胞更換培養基后再加CCK-8檢測。細胞培養基酚紅不影響測定結果。

    3)為使CCK-8試劑盒培養基充分混勻,減少CCK-8在移液器上的殘留,建議加樣前用培養基稀釋CCK-8試劑,混勻后加樣。

    4)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

    CCK-8與同類試劑比較

     

    檢測方法

    MTT

    XTT

    WST-1

    CCK

    產品性狀

    粉末

    2瓶溶液

    溶液

    1瓶溶液

    使用方法

    配成溶液后使用

    現配現用

    即開即用

    即開即用

    檢測靈敏度

    很高

    很高

    檢測時間

    較長

    較短

    較短

    zui短

    檢測波長

    560-600nm

    420-480nm

    420-480nm

    430-490nm

    細胞毒性

    高,細胞形態完全消失

    很低,細胞形態不變

    很低,細胞形態不變

    很低,細胞形態不變

    試劑穩定性

    一般

    較差

    一般

    很好

    批量樣品檢測

    可以

    非常適合

    非常適合

    非常適合

    便捷程度

    一般

    便捷

    便捷

    非常便

     

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    產品名稱

    貨號

    規格

    保存

    價格(元)

    活性檢測CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒

    D3100L4053

    100T(1ml)

    4℃

    245

    活性檢測CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒

    D3100L4054

    500T(5ml)

    4℃

    595

    活性檢測CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒

    D3100L4055

    1000T(10ml)

    4℃

    1050

    活性檢測CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒

    D3100L4056

    3000T(30ml)

    4℃

    2080

    活性檢測CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒

    D3100L4057

    10000T(100ml)

    4℃

    5850

     

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