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    外泌體提取試劑盒(細胞上清)

    簡要描述:Quick Cell 外泌體提取試劑盒(細胞上清)是由細胞特異性分泌的包含RNA和蛋白質的小囊泡(30-150 nm),在血液、唾液、尿液及乳汁等體液中大量存在。外泌體被認為具有細胞間信使的功能,參與細胞間的通訊。然而關于它的分泌和攝取及其組成、“運載物"及相應功能的分子機制目前尚不明晰。

    • 產品型號:AC15L412
    • 廠商性質:生產廠家
    • 更新時間:2022-06-01
    • 訪  問  量:917

    詳細介紹

    品牌自營品牌貨號AC15L412
    規格20T供貨周期現貨
    應用領域化工,生物產業,制藥
    外泌體提取試劑盒(細胞上清

    產品描述
      外泌體exosome是由細胞特異性分泌的包含RNA和蛋白質的小囊泡(30-150 nm),在血液、唾液、尿液及乳汁等體液中大量存在。外泌體被認為具有細胞間信使的功能,參與細胞間的通訊。然而關于它的分泌和攝取及其組成、“運載物"及相應功能的準確分子機制目前尚不明晰。
      外泌體的生物學功能研究中需要分離完整的外泌體顆粒,而傳統超速離心方法步驟繁瑣、硬件要求高、操作難度大。李記生物自主開發的外泌體快速提取試劑盒,經過優化處理,適用于細胞培養上清液(尿液等)中的外泌體提取,并搭配純化過濾裝置,可快速高效地獲得高純度外泌體顆粒, 可用于電鏡分析、NTA粒徑分析、核酸分析、蛋白分析、細胞學實驗和動物實驗等。
    訂購信息

    產品名稱貨號規格價格
    Quick Cell 外泌體提取試劑盒(細胞上清)AC15L412 20T4700


    產品組成

    組分名稱規格貨號
    外泌體濃縮試劑(ECS)外泌體濃縮試劑(ECS)

    外泌體濃縮試劑(ECS)

    100 mLAC15L412-1

    外泌體純化濾器(EPF)

    2.0 mL 20 TubesAC15L412-2
    *RNase/DNase Free, Sterile

    儲存條件
      本品在室溫可穩定保存24個月,使用前請充分混勻。
    自備材料
    1. 高速離心機(可以達到10000 g離心力),渦旋振蕩器;50 mL15 mL離心轉子, 2 mL離心轉子;50 mL15 mL離心管,1.5 mL離心管;
    2. 1×PBS緩沖液;
    操作規程
    一、樣品預處理
    1. 取樣:如果是凍存樣品,從冰箱取出后于25℃水浴中進行解凍,將完全融化后的樣品置于冰上;如果是新鮮樣品,收集樣品后置于冰上。
    2. 樣品初始用量:對于細胞上清樣品,單次提取時的樣品量至少20 mL。
    3. 離心去細胞碎片:將樣品轉移至離心管中,4℃,3000×g離心10 min,取上清轉移到新離心管中。
    二、提取外泌體
    1. 上清液預處理:在去除雜質的離心上清液中加入
    外泌體濃縮試劑(ECS),加入ECS與細胞上清液的體積比為1: 4.即若細胞上清液液體積是20 mL,則ESC的量為5 mL。
    2. 溶液混合:加入ECS試劑后將離心管蓋緊,通過渦旋振蕩器混勻1 min,再放置于2℃8℃靜置2 h。
    3. 沉淀外泌體:取出裝有混合液的離心管,4℃10000×g離心60 min,棄上清,沉淀中富含外泌體顆粒。:盡可能吸凈上清液。
    4. 外泌體重懸:取100 μL 1×PBS均勻吹打離心沉淀物,待其均勻懸浮在PBS中后,將重懸液轉移至新的1.5 mL離心管中。
    5. 收獲外泌體顆粒:將含有重懸液的1.5 mL離心管,4℃12000×g離心2 min,保留上清液,該上清液中富含外泌體顆粒。
    三、純化外泌體
    1. 純化外泌體:將收獲的外泌體顆粒粗品轉入
    外泌體純化濾器(EPF)上室中,4℃,3000×g離心10 min,離心后收集EPF柱管底的液體,此液體即為純化后的外泌體顆粒。
    2. 外泌體的保存:純化后的外泌體以保存于-80℃低溫冰箱中,以備后繼實驗使用。
    注意事項
    1. 對于待測樣品粘度過大時,可將樣本用4℃預冷的1×PBS緩沖液進行等體積稀釋處理。
    2. 當血清樣品收獲的外泌體濃度較高,收獲的外泌體顆粒無法通過EPF柱純化時,可用4℃預冷的1×PBS進行稀釋后再通過EPF柱離心。
    3. 針對外泌體標志蛋白(CD 63, CD 9, CD 81等)進行Western blot檢測,可以鑒定所提的外泌體
    4. 多數情況下,細胞在體外培養需要血清,但血清中含有外泌體,為了去除血清的外泌體,可以通過100000×g超速離心過夜,去除血清外泌體或者可選擇無血清培養基進行培養。
    5. 在收獲細胞時,應確定死亡細胞占所有細胞5%以下。細胞死亡過程中會釋放大量大小不等的囊泡,細胞終會裂成碎片,它們在外泌體的純化過程中會污染活細胞產生的外泌體,影響外泌體的提取。
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