• <strong id="soye6"><label id="soye6"></label></strong>
  • <table id="soye6"><bdo id="soye6"></bdo></table>
    <bdo id="soye6"><blockquote id="soye6"></blockquote></bdo>
  • 您好!歡迎訪問上海李記生物科技有限公司網站!
    咨詢熱線

    18201805506

    當前位置:首頁 > 產品中心 > 細胞生物學 > 細胞轉染 > AC04L092病毒轉染細胞試劑

    病毒轉染細胞試劑

    簡要描述:病毒轉染細胞試劑,EZ Trans細胞轉染試劑與EZ 慢病毒系列,EZ Trans細胞轉染試劑作為新一代的轉染試劑,其轉染原理是帶正電的陽離子聚合物與核酸中帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,并通過胞吞作用進入細胞。

    • 產品型號:AC04L092
    • 廠商性質:生產廠家
    • 更新時間:2022-08-12
    • 訪  問  量:107

    詳細介紹

    品牌自營品牌貨號AC04L092
    供貨周期現貨應用領域化工,生物產業,綜合

     

    EZ Trans細胞轉染試劑EZ 慢病毒系列/病毒轉染細胞試劑

    轉染試劑產品描述

    EZ Trans細胞轉染試劑作為新一代的轉染試劑,其轉染原理是帶正電的陽離子聚合物與核酸帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用,并通過胞吞作用進入細胞。

    產品經過李記生物的優化處理,具有轉染效率高,細胞毒性低,操作簡單,重復性好,適用范圍廣等特點。

    以下為高效轉染試劑說明書,其他產品/病毒轉染細胞試劑詳情請問銷售人員。

    細胞轉染試劑與慢病毒訂購信息

    產品名稱

    貨號

    規格

    價格

    EZ Trans Plus細胞轉染試劑(Ⅱ)

    AC04L011

    1 mL

    690

    EZ Trans細胞轉染試劑(高效)

    AC04L091

    1 mL

    300

    EZ Trans細胞轉染試劑(高效)

    AC04L092

    50 mL

    3200

    EZ Trans細胞轉染試劑(低毒

    AC04L098

    1 mL

    300

    EZ Trans細胞轉染試劑(低毒

    AC04L099

    50 mL

    3200

    EZ 慢病毒感染增強劑

    AC04L432

    50 mL

    1800

    EZ 慢病毒感染增強劑

    AC04L433

    100 mL

    3200

    EZ慢病毒濃縮液

    AC04L441

    50 mL

    780

    EZ慢病毒濃縮液

    AC04L442

    100 mL

    1280

    EZ慢病毒載體凍存保護液

    AC04L452

    50 mL

    780

    EZ慢病毒載體凍存保護液

    AC04L453

    100 mL

    1280

    轉染試劑運輸與保存

    藍冰運輸。4℃保存,有效期12個月。】:不可冷凍!

    高效轉染試劑使用方法(以 24 孔板為例,其他培養皿中轉染請參考表1)

    1. 接種細胞

    對于貼壁細胞,轉染前18-24 h進行鋪板(不含抗生素),使其在轉染時的密度大約在80%左右。對于懸浮細胞,轉染當天,配制EZ Trans-DNA復合物之前進行鋪板,每500 µL生長培養基中加入4~8×105cells。  

    【注】:培養液中的血清不影響轉染效率。轉染試劑使用量受細胞類型及其他實驗條件影響,建議初次使用時設置梯度進行優化最佳使用量。

    2. 準備EZ Trans-DNA復合物

    1對于每孔細胞,將1 μg質粒DNA稀釋到40 μL無血清的高糖DMEM培養基(或者OPTI-MEM Ⅰ 培養基),混勻。

    2對于每孔細胞,將3 μL EZ Trans轉染試劑稀釋到40 μL無血清的高糖DMEM培養基(或者OPTI-MEM Ⅰ 培養基),輕輕混勻。

    【注】:無血清的高糖DMEM培養基是稀釋液,不能使用含血清的培養基進行DNA和EZ Trans轉染試劑的稀釋。因為EZ Trans-DNA轉染復合物的形成過程不能含有血清。

    3將稀釋好的EZ Trans轉染試劑盡快全部加入到已稀釋好的質粒DNA中,輕輕混勻。

    【注】:此混合的順序不能反向進行。

    4室溫放置10-15 min,以形成EZ Trans-DNA復合物。

    3. 轉染細胞

    1將上述80 μL EZ Trans-DNA轉染復合物均勻滴入到含細胞的培養皿中。輕輕晃動培養皿或輕微振蕩,讓EZ Trans-DNA復合物分散均勻。

    237℃,5% CO2培養箱培養6-18 h,去除含EZ Trans-DNA復合物的培養液,更換新的培養液,繼續培養至對轉入基因表達分析。

    【注】:篩選穩定轉染細胞株,轉染細胞24 h后,將細胞傳代至新鮮的生長培養基中(將細胞稀釋10倍以上),在37℃,5% CO2培養箱中孵育24 h,加入篩選培養基。在有轉染抗性基因相匹配的藥物篩選條件下,約 1~2周可篩選到耐藥性克隆,在這期間需經常更換含篩選藥物的生長培養基。

    注意事項

    1. 本產品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領域。

    2. 質粒質量:請務必使用高純度無內毒素轉染級質粒。通過260 nm光吸收測定DNA 濃度,260 nm / 280 nm比值確定 DNA 純度(比值應該在1.8~2.0的范圍之內)。如有可能,請通過瓊脂糖凝膠電泳檢測質粒的完整性。

    3. 細胞條件:使用適當保存和經常傳代的健康細胞。確保細胞沒有被細菌、真菌或支原體污染。如果細胞是近期復蘇的液氮凍存細胞,請在轉染前至少傳代兩次。建議使用胎牛血清(貨號:AC03L055)培養細胞。

    4. 細胞培養液要求:EZ Trans細胞轉染試劑可用于有血清培養基的轉染,并且轉染前不需要換培養基。但是,制備轉染復合物時要求用無血清培養基稀釋DNA和轉染試劑,因為血清會影響復合物的形成。確保細胞培養液沒有被細菌、真菌或支原體污染。轉染時培養液中不添加抗生素。

    5. DNA濃度和EZ Trans細胞轉染試劑量的優化:DNA濃度和轉染試劑使用量受細胞類型及其他實驗條件影響,初次使用應優化DNA濃度和轉染試劑量以得到最大的轉染效率。使用者可嘗試每 1 μg DNA使用 1~4 μL體積EZ Trans細胞轉染試劑進行優化。DNA和轉染試劑的比例,通常推薦是1:2~1:5。

      1:不同培養體積對應的待轉DNA、EZ Trans、稀釋液用量

    培養器皿

    培養液體積(mL)

    DNA量(μg)

    EZ Trans (μL)

    稀釋液(μL)

    48孔板

    0.3

    0.5

    1.5

    2 × 25

    24孔板

    0.5

    1

    3

    2 × 40

    12孔板

    0.75

    1.5

    4.5

    2 × 60

    6孔板

    1

    3

    9

    2 × 125

    35 mm培養皿

    1

    3

    9

    2 × 125

    60 mm 培養皿

    3

    6

    18

    2 × 250

    100 mm 培養皿

    9

    12

    36

    2 × 500

    【注】:該表使用量僅供參考,具體使用量還需根據細胞類型及其他實驗條件進行優化。使用時DNA(μg): EZ Trans細胞轉染試劑(μL)比值保持在1:2~1:5。

    相關產品推薦

    活性檢測CCK-8細胞增殖與毒性檢測試劑盒(貨號:AC11L053)

    EZ Trans細胞轉染試劑(高效)(貨號:AC04L092)

     

     

     

    產品咨詢

    留言框

    • 產品:

    • 您的單位:

    • 您的姓名:

    • 聯系電話:

    • 常用郵箱:

    • 省份:

    • 詳細地址:

    • 補充說明:

    • 驗證碼:

      請輸入計算結果(填寫阿拉伯數字),如:三加四=7
    掃一掃,關注微信
    地址:上海市浦東新區川沙路6619號 傳真:021-50724961
    ©2022 上海李記生物科技有限公司 版權所有 All Rights Reserved.  備案號:滬ICP備16001244號-2
    另类AV
  • <strong id="soye6"><label id="soye6"></label></strong>
  • <table id="soye6"><bdo id="soye6"></bdo></table>
    <bdo id="soye6"><blockquote id="soye6"></blockquote></bdo>